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Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,是一种类似于MTT的化合物,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)存在的情况下,被线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物(formazan)。
细胞增殖越多越快,颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅,对于同样的细胞,颜色的深浅与活细胞的数量成正比,因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
CCK8法 VS MTT法
A. MTT法在570nm有最大的吸光值,其线性范围在1左右,并且MTT这个染料是脂溶性的,所以最后显色的时候,需要用到DMSO有机溶剂,溶解染料,有一定的毒性并增加实验流程。
B. CCK8法在450nm有最大的吸光值,线性范围更大,不超过3是可以接受的,并且CCK8染料是水溶性的,实验操作简单,毒性小。
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